ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ФИЦ ПХФ и МХ РАН |
||
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для многоцветной иммуноцитохимической диагностики паранеоплазии шейки матки. Осуществляют получение клеточной суспензии клинического материала, окрашивание флуоресцентным красителем с последующей флуоресцентной микроскопией. Клеточную суспензию добавляют к смеси антител, специфически направленных к белкам Р16/Р16INK4a, Ki67 и EpCAM/clone BerEp4, меченых флуоресцентными красителями различной длины волны. Смесь включает антитела к белку Ki67, конъюгированные с флуорофором с длиной волны красного спектра, антитела к белку EpCAM/clone BerEp4, конъюгированные с флуорофором с длиной волны зеленого спектра, и антитела к белку Р16/Р16INK4a, конъюгированные с флуорофором с длиной волны синего спектра. Инкубируют в темном месте при комнатной температуре в течение 10-15 минут. После инкубации осуществляют флуоресцентную микроскопию смеси антител и клеточной суспензии, не дожидаясь высыхания. При обнаружении в цитологическом материале минимум одной клетки с тройным иммунным окрашиванием на белки Р16/Р16INK4a, Ki67 и EpCAM/clone BerEp4 диагностируют паранеоплазию шейки матки. Способ обеспечивает возможность быстрой, эффективной диагностики тяжелой дисплазии и опухолей шейки матки за счет возможности методом иммуноцитохимии быстрого параллельного определения коэкспрессии белков Ki67, Р16 и дополнительного подтверждения эпителиальной природы клеток путем определения экспрессии белка EpCAM/clone BerEp4 на поверхностной мембране исследуемых клеток. 7 ил., 3 пр.