![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ФИЦ ПХФ и МХ РАН |
||
Способ получения средства для борьбы с энтомопатогенным грибом Ascosphaera apis путем измельчения растительного сырья, его экстракции, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют корневища крапивы двудомной (Urtica dioica), которые измельчают до гранул диаметром не более 0,3 мм и экстрагируют раствором 0,2 М хлористого натрия в соотношении гранулы измельченных корневищ: раствор как 1:20 соответственно, в течение 10-12 часов при температуре 4-5оС, смесь цен-трифугируют при 5000-6000 об/мин подкисляют 0,5 н HCI при рН 4,0 в те-чение 2-3 час при температуре 4-5оС до образования осадка, который цен-трифугируют при 5000-6000 об/мин в течение 15-20 мин при температуре 4-5оС, из полученной надосадочной жидкости высаливают белки сульфатом аммония при 80%-ном насыщении в течение 24 часов при 18-200С, получен-ный осадок центрифугируют при 5000-6000 об/мин при 4-50С в течение 15-20 мин, осадок суспендируют в 30 мл дистиллированной воды и наносят на колонку с акрилексом Р-30 (гелем на основе полиакриламида), уравновешанной дистиллированной водой, затем осуществляют элюцию путем пропускания дистилированной воды со скоростью 20 мл/час, измеряют оптическую плотность белка и ингибиторную активность по отношению к трипсину и химотрипсину, после чего собирают фракции белков- ингибиторов трипсина с молекулярной массой 8-22 кДа, ингибиторов химотрипсина с молекулярной массой 23-25 кДа и растительного белка с молекулярной массой 50-70 кДа, после чего концентрируют фракции на ротационном выпаривателе при температуре 30-40оС в течение 1-2 часов и высушивают до концентрации влаги 5-7% и получают порошок, содержащий в мас. %. растительный белок ингибиторов трипсина с молекулярной массой 8-22 кДа 40 растительный белок ингибиторов химотрипсина с молекулярной массой 23-25 кДа 20 растительный белок с молекулярной массой 50-70 кДа 10, который растворяют в 100 мл дистиллированной воды.