![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ФИЦ ПХФ и МХ РАН |
||
Исследование функционального универсализма фитохрома А растений (phyA), а именно, природы обнаруженной у него структурной гетерогенности и её функциональной значимости.
В экспериментах на гомогенатах из тканей кукурузы было подтверждено, что phyA" является мембрано-(протеин-) связанной формой. С другой стороны, в сравнительных исследованиях нативного фитохрома А и его химерной формы, связанной с зеленым флуоресцирующим белком (phyA-GFP) установлено, что нативные пулы phyA участвуют в светоиндуцированном ядерно-цитоплазматическом разделении. Этот факт объясняет образование в ходе процесса транслокации фитохрома двух типов сгустков пигмента в ядре клетки. В экспериментах с использованием мутантного phyА с аминокислотной заменой Ser/Ala, экспрессированного в Arabidopsis, установлено, что такая замена препятствует образованию пула phyA", а значит, механизм его образования может быть связан с фосфорилированием пигмента по этим сериновым остаткам. Прослежено влияние оверэкспрессии мутантного и нормального phyA риса на прорастание семян Arabidopsis; показано, что phyА’’ ингибирует стимулирующее действие phyA’. Прослежено влияние УФ света на состояние фитохрома А и его регуляцию накопления активного и неактивного протохлорофиллидов в этиолированных проростках гороха и фасоли. Обнаружен эффект стимулирования накопления пигмента при кратковременном УФ предосвещении эпикотелей, а также при их длительном освещении дальним красным светом (реакция типа HIR). Обнаружена органо-тканевая специфичность эффекта УФ.
госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию) |
# | Сроки | Название |
1 | 1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Механизмы фотореакции, фоторегуляции и преобразования информации в фитохромной и родственных системах |
Результаты этапа: В нашей группе обнаружен полиморфизм основного фитохрома (phyA), существование двух его типов (phyA’ и phyA”), что может объяснять его уникальные свойства – способность опосредовать все известные типы фоторегуляторных реакций. Мы продолжили его исследование с использованием флуорометрии и фотохимии пигмента in vivo. Изучали (1) возможную ассоциацию пулов phyA’ и phyA” с водно-мембранными фракциями клетки; (2) локализацию пулов phyA в клетке путем сопоставления нативного phyA и его химерного аналога, снабженного флуоресцентным маркером, phyA-GFP; (3) зависимость состояния phyA и его пулов в трансгенном Арабидопсисе, экспрессирующем мутантный phyA риса, в котором серины заменены на аланины в N-концевом субдомене; (4) влияние УФ света на регуляторные свойства phyA. В экспериментах на гомогенатах из тканей кукурузы было установлено, что в осадке из гомогената корней кукурузы присутствует только пул phyA’’, в супернатанте - phyA’ и phyA”. Этот факт подтверждает наши данные о том, что phyA" является мембрано-(протеин-) связанной формой. С другой стороны, в сравнительных исследованиях нативного фитохрома А и его химерной формы, связанной с зеленым флуоресцирующим белком (phyA-GFP) установлено, что нативные пулы phyA участвуют в светоиндуцированном ядерно-цитоплазматическом разделении. Этот факт объясняет образование в ходе процесса транслокации фитохрома двух типов сгустков пигмента в ядре клетки. В экспериментах с использованием мутантного phyА с аминокислотной заменой Ser/Ala, экспрессированного в Arabidopsis, установлено, что такая замена препятствует образованию пула phyA". Этот факт свидетельствует в пользу того, что механизм его образования может быть связан с фосфорилированием пигмента по этим сериновым остаткам. Прослежено влияние оверэкспрессии мутантного и нормального phyA риса на прорастание семян Arabidopsis; показано, что phyА’’ ингибирует стимулирующее действие phyA’. Наконец, прослежено влияние УФ света на состояние фитохрома А и его регуляцию накопления активного и неактивного протохлорофиллидов в этиолированных проростках гороха и фасоли. Прослежен эффект стимулирования накопления пигмента при кратковременном УФ предосвещении эпикотелей, а также при их длительном освещении дальним красным светом (реакция типа HIR). Обнаружена органо-тканевая специфичность эффекта УФ: он не проявлялся в этиолированных листьях. | ||
2 | 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Механизмы фотореакции, фоторегуляции и преобразования информации в фитохромной и родственных системах |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".