|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ФИЦ ПХФ и МХ РАН |
||
Рекомбинантная Химотрипсиноподобная Пептидаза Tenebrio molitor с Неканоническим Субстрат-связывающим Сайтомстатья Исследовательская статья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАКСтатья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
- Авторы: Терещенкова В.Ф., Жиганов Н.И., Губаева А.С., Акентьев Ф.И., Дунаевский Я.Е., Козлов Д.Г., Белозерский М.А., Элпидина Е.Н.
- Журнал: Прикладная биохимия и микробиология
- Том: 60
- Номер: 3
- Год издания: 2024
- Издательство: ФГБУ "Издательство "Наука"
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 344
- Последняя страница: 355
- DOI: 10.31857/S0555109924030045
- Аннотация: Охарактеризована щелочная химотрипсиноподобная сериновая пептидаза большого мучного хрущака Tenebrio molitor с неканоническим субстрат-связывающим субсайтом, которая может быть использована в качестве добавки в различные биопрепараты. Фермент был получен в форме рекомбинантного препарата, очистка была проведена с использованием аффинной хроматографии на Ni2+-NTA агарозе. Было определено, что константы специфичности (kcat/Km) для субстратов химотрипсина Glp-AAF-pNA, Suc-AAPF-pNA и Ac-Y-pNA составляли 7.0, 4.2 и 0.9 (мкM∙мин)–1 соответственно. Оптимум активности наблюдался при рН 9.0. Фермент был стабилен при щелочных рН, в присутствии БСА также и при кислых рН. Пептидаза ингибировалась синтетическими ингибиторами, такими как PMSF, TPCK, химостатин, в то время как ЭДТА, Е-64, пепстатин не влияли на активность фермента.Очищенный фермент продемонстрировал высокую стабильность в течение 2.5 ч в присутствии БСА.Короткий жизненный цикл насекомого и секреция множества пептидаз в средней кишке с высокойкаталитической активностью и стабильностью могут сделать T. molitor отличным альтернативным источником промышленно важных ферментов для использования в качестве добавок в различных биопрепаратах (например, пятновыводителях, моющих средствах и т. п.).Ключевые слова: сериновые пептидазы, химотрипсиноподобные пептидазы, протеолитическиеферменты, пептидазы насекомых, SerP38, Tenebrio molitorИсследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22–24–00553, https://rscf.ru/project/22–24–00553/.
- Добавил в систему: Терещенкова Валерия Феликсовна
Прикрепленные файлы
| № | Имя | Описание | Имя файла | Размер | Добавлен |
|---|